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非洲猪瘟

来源:      发布时间:1553481632

  为有效应对非洲猪瘟疫情,做好非洲猪瘟外堵内防工作,提升应急处置能力,实验室密切关注非洲猪瘟疫情进展,查阅相关资料,在青岛海关关区非洲猪瘟疫情防控应急管理培训班上就“非洲猪瘟综合防控技术”进行专题讲解。积极开展实验室检测工作,积极制定开展非洲猪瘟检测的实验室需要取得的资质要求,以及样品的前处理灭活要求和生物安全措施,确保安全、准确、扎实开展非洲猪瘟检测工作。

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  中心非洲猪瘟项目已获得CMA/CNAS认可和山东省畜牧兽医局认可(【2019】12号公告)。

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非洲猪瘟科普:

  非洲猪瘟是养猪业的重大灾难,关于非洲猪瘟我们不禁会有三个疑问,非洲猪瘟是什么?为什么要对非洲猪瘟进行防控?如何对非洲猪瘟进行防控?

1、非洲猪瘟是什么?---WHAT

  非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV )引起的猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。目前尚无有效的疫苗和治疗方法。非洲猪瘟是一种动物传染病,顾名思义,它具有传染性但是他不感染人,对人无害。

  非洲猪瘟的病原是非洲猪瘟病毒,这个病毒属于非洲猪瘟病毒属,非洲猪瘟病毒科,目前该病毒科只有非洲猪瘟病毒一种病毒,病毒基因组为双股线性DNA,具有囊膜,病毒目前有23个基因型,但是只有一个血清型,成熟的病毒粒子由多层结构组成,包括二十面体的衣壳,含有类脂的囊膜,病毒粒子内膜和核衣壳,一个成熟的病毒粒子大约含有50多种病毒编码的蛋白质,其中包括结构蛋白、基因转录和RNA加工所需的酶, 这些蛋白是构成病毒粒子结构的主要成分, 对病毒粒子的再次感染有着重要作用.

  非洲猪瘟病毒从病原学角度看具有3个特点,一、病毒基因组很大,是蓝耳病病毒的12倍,是猪瘟病毒的15倍,是口蹄疫病毒的24倍,可编码150-200种病毒蛋白,其中构成病毒粒子的结构蛋白有P72,P49,P220,P62,CN2v蛋白等,P72蛋白P72蛋白位于病毒衣壳的表面, 具有良好的反应原性和抗原性, 是病毒二十面体衣壳的重要组成成分,同时P72蛋白的编码基因具有较高的同源性,常用来进行基因分型。目前已经有11株非洲猪瘟病毒的全基因已被测序,其中1株为无毒力的西班牙BA71V分离株, 1株为有毒力的西班牙E75分离株, 1株低毒力毒株分离于葡萄牙软蜱体内, 剩余8株分离于非洲家猪或野猪体内。其中细胞适用株BA71V是实验室是研究的主要对象。第二个特点,那就是病毒变异频繁,病毒基因组中央是长约125kb的保守区, 左端48kb和右端22kb中间区域存在差异,是可变区,这也是不同分离株的基因组长度存在差异的主要原因,该病毒目前已经有23个基因型了,我国沈阳首例确证为非洲猪瘟的病例,分离到的病毒对病毒的P72基因进行了测序,测序后,进行了进化树分析,得出结论我国首次分离的毒株属于基因型2型,与2007年格鲁吉亚分离株属于同一进化分株。病原学的第三个特点是病毒对环境的抵抗力很强,病毒在冻肉中可以存活数10年,未熟肉品、腌肉、泔水中可长时间存活,该病毒为囊膜病毒, 能够抵抗蛋白酶的作用, 对乙醚及氯仿等脂溶剂敏感, 但易被胰酶灭活。病毒在p H 4~10的溶液中比较稳定, 但对温度非常敏感, 56℃加热70min或60℃加热20min可使病毒灭活。因此如果饲喂猪使用泔水则必须高温无害化处理,彻底的杀灭病毒。

  非洲猪瘟不仅仅病原学有特点,流行病学也具有特点,非洲猪瘟的传染源为被非洲猪瘟病毒感染的软蜱、感染的猪、包括家猪和野猪,被污染的饲料,例如泔水、猪肉制品等、污染的设施工具例如运输的车辆,饲养人员的衣服、鞋子、注射或手术使用的器具等等,这些都是传染源。

  非洲猪瘟的感染途径和传播方式多种多样,通过家猪、野猪之间直接接触感染,通过接触被污染的饲料、泔水、圈舍、运输工具、器具等间接接触感染,通过虫媒钝缘软蜱叮咬感染。

  非洲猪瘟的终末宿主是猪,疣猪、丛林猪、巨型森林猪等非洲野猪; 钝缘(软)蜱为保藏宿主,作为保藏宿主,非洲猪瘟病毒在软蜱体内可持续感染几个月到5年,因为钝缘蜱的吸血时间短且饱血后即刻从宿主上脱落,另外其吸血行为仅在晚上动物休息时进行,因此由这些蜱跟随宿主到达新的地区或国家的可能性很小,甚至可以忽略。所以钝缘蜱在保持病毒疫源地中起重要作用,但对病毒的地理传播不起主要作用。

  同样作为保藏宿主,野猪则在病毒的地理传播中起到主要作用。非洲猪瘟的这两个保藏宿主在疾病的传播和定殖中起到了非常重要的作用,因此一旦保藏宿主野猪或软蜱受到感染,就会导致病毒在自然界稳定长期存在,形成自然疫源地,难以彻底根除。我们通过这张图来解释一下,保藏宿主在非洲猪瘟的传播中所起到的作用,野猪和软蜱组成的是野生环节,虽然这个环节中的动物不发病,但却是影响最大的,野生环节可以渗透到养殖环节也可以进入到流通环节中,比如感染的野猪接触了家猪或是污染了家猪的饲料或水源,家猪就可能受感染,然后家猪的养殖环节就引物了病原,感染猪如果进入流通环节,那受污染的餐厨垃圾,泔水又会重新进入养殖环节,蜱虫叮咬了患病家猪,就把病毒又带回了野生环节,这样反复如此的循环,疾病很控制根除。

  非洲猪瘟之所以叫非洲猪瘟是因为从1921年首次在肯尼亚发现直至在1957年前,该病只在非洲流行,1957年该病首次冲出非洲在葡萄牙发生,然后在欧洲大陆就开始了疯狂开挂的模式,欧洲到现在也有报道。1971年~80年非洲猪瘟传入了南美洲,2007年,进入高加索地区和俄罗斯联邦, 2017年3月,在距离我国边境满洲里口岸仅1000公里的俄罗斯远东伊尔库茨克发生过疫情。据海关总署消息,目前有16个国家和整个非洲为非洲猪瘟疫区,包括格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆、俄罗斯、乌克兰、意大利等。 近期保加利亚也有报道。

  2018年8月31日,英国环境、食品和农村事务部动植物卫生局发布的“根据中国疫情公布的数字表明,非洲猪瘟疫情没有得到及时报告,病毒有机会在猪群中传播,可能是因为没有迅速清除动物尸体或对猪场进行消毒。血液、粪便、尿液和组织在很长一段时间内都具有传染性,而且发病与受污染的水有关。同时也说“当非洲猪瘟“跳跃”式传播时,这这是由于活猪或受感染/被污染的产品运输引起。”

  非洲猪瘟病毒主要破坏的是机体的免疫系统,病毒通过口腔或鼻腔侵入机体,先在扁桃体、下颌淋巴结和巨噬细胞中复制增殖,然后经血液和淋巴液转移至肺、骨髓、肝脏、淋巴结、脾和肾脏等器官。    

  自然感染动物的潜伏期从4-19天不等,临床表现从感染7天之内急性死,到持续几周或几个月的慢性感染不等,根据临床表现可以分为特急性、急性、亚急性和慢性,特急性主要表现为:高烧41-42度,食欲不振和不活动,通常1-3天内死亡,死亡率100%;急性:发热40-42度,食欲不振,嗜睡且虚弱,蜷缩在一起,呼吸频率增加,根据感染的病毒毒力不同,死亡时间不同,高毒力毒株感染一般6-9天死亡,中等毒力毒株感染一般11-15天死亡,死亡率几乎100% 。亚急性:临床症状与急性相似,但并不强烈,一般为中等毒力毒株感染,死亡率在30-70%,幸存猪会在一个月后恢复,这些恢复的猪都可能会成为传染源。慢性:主要发生在非洲猪瘟长期存在的国家,有报道称这是可能是自然致弱毒株感染,也有报道称可能是上世纪伊利比亚半岛失败弱毒苗的田间试验造成的,慢性型的临床表现主要为轻度发烧、呼吸困难,关节肿胀,皮肤红斑、凸起,坏死等,此类的死亡率低于30%。

  非洲猪瘟的临床症状与经典猪瘟非常相似,主要是淋巴器官、网状内皮组织、肾脏、皮下广泛出血,脾脏肿大,母猪流产,值得注意的是,目前猪瘟是有疫苗的,而且很多猪也是对猪瘟进行免疫的,如果免疫的猪出现了急性的猪瘟症状,首先就应该怀疑是非洲猪瘟感染。

急性非洲猪瘟剖检的最为容易辨认的主要病变为胃、肝、肾等部位的淋巴结肿大出血、肾脏皮质点状出血、脾脏肿大、易碎、有梗塞的迹象(暗色发黑的),同时非洲猪瘟还会造成各脏器的出血,心,膀胱,胃等。

慢性非洲猪瘟的临产症状主要表现为皮下出血,皮肤坏死、关节肿大,剖检可能出现淋巴结肿大,肺脏的干酪样实质化病变

同时非洲猪瘟还应该注意与高致病性蓝耳病、猪丹毒、猪霍乱沙门氏菌病、猪巴氏杆菌病、猪伪狂犬病、猪皮炎肾病综合征的鉴别诊断。这些病在发病时的临床表现均与非洲猪瘟有相似的地方,比如猪丹毒临床上会出现和非猪猪瘟一样的皮下出血造成的发红或发绀,也会出现母猪的流产,剖检症状中肾脏的出血、粘膜出血等等,这一系列猪病在临床上无法通过肉眼进行区别,通常需要借助实验室的手段。

  从实验方法上分, 非洲猪瘟的实验室诊断主要有病原学和血清学两个方面,病原学的检测方法有病毒分离鉴定、血细胞吸附试验、直接荧光抗体试验、聚合酶链式反应,血清学的方法有间接免疫荧光、酶联免疫吸附实验,其中最方便、最安全最常用的主要是Elisa和聚合酶链式反应,酶联免疫吸附试验 (ELISA) , 即利用抗原抗体进行免疫反应的定性和定量检测, 其已被广泛应用于生物医学领域。现在针对非洲猪瘟也有商品化的试剂盒。一般情况下, 非洲猪瘟病毒进入猪体内, 7d后便可诱导产生较高的IgG抗体, 当然针对不同蛋白也会出现个别差异, 但不管怎样, 该方法仍是最为快速、方便的方法。当前, 市面上尚未使用非洲猪瘟相关疫苗, 因此只要抗体检测阳性, 便可确诊为非洲猪瘟病毒感染。但非洲猪瘟引起的急性病例中需结合其它检测方法进行确诊, 因为机体可能尚未产生抗体便已死亡。PCR即聚合酶链式反应, 是体外扩增基因的一种方法。研究表明, 非洲猪瘟感染8h, 便可从血液中检测到其核酸物质, 因此, 针对非洲猪瘟病毒保守区域设计引物, 对采集的血液或组织病料等相关物质进行DNA提取, 进行PCR反应, 可对其进行快速准确诊断。目前OIE的陆生动物诊断手册中有两种聚合酶链式反应的,一种是普通的PCR,针对VP72蛋白编号基因设计的引物,扩增产物在257bp,一种荧光定量PCR, 通俗讲是PCR的升级版, 实时荧光定量PCR,具有特异性好、灵敏度高、速度快、高通量等优势,可以检测出各种样本中ASFV的DNA,可以在ASF爆发时实现早期诊断,其更加敏感、准确。

图A中猪只虚弱,可能因为发烧的原因,蜷缩在一起取暖

图B,C,D,E,F是猪的腹部、后腿、耳朵等部位的皮下出血,呈现的皮肤发红或发绀

图G,H,I是腹部、颈部、耳朵皮肤上的坏死病变

2、为什么要防控非洲猪瘟?----WHY

  为什么非洲猪瘟的威胁如此的大?这个非洲猪瘟这个病毒自身的特点有关,非洲猪瘟病毒对环境抵抗力很强,且具有高度传染性,传播途径多样,目前尚无有效的疫苗,同时也和非洲猪瘟所影响的猪产业有关,具体的有以下三个方面:

(1)“猪粮安天下”这个话怎么理解,网上的观点很多,但是主要是两个方面,第一,猪肉是我国居民的主要蛋白质来源,猪肉消费占到总肉类消费60%以上,是绝对的餐桌主导,这是人民生活的刚性需要,第二,猪肉价格占到CPI比重的3%,猪肉价格的波动不但直接影响着城乡居民的生活水平以及居民消费情况,而且也影响着中国宏观经济的波动和宏观调控政策走向。从全球层面来看,我国是世界上最大的生猪养殖国家,生猪存栏量超过5亿头,占世界一半以上。养猪业占我国畜牧业总产值的48%,是我国畜牧业的主导产业,如果非洲猪瘟在中国防控不好,那对我国养猪业,对人民生活、对我国国民经济都会产生很大的影响,甚至会造成社会的动荡。

(2)非洲猪瘟病毒对环境的抵抗性强,也增加了他对威胁度。非洲猪瘟在冻肉中可存活数年,在泔水中也可长时间的存活,数据显示,在冻结肉中病毒可存活近3年,在污染的猪圈中可存活1个月。

(3)非洲猪瘟的传播途径很多,我们在前面的流行病学特点中也做过介绍,如果这个病毒在环境中定殖,就会形成自然疫源地,根除非常困难。

  来看一下我们的近邻--俄罗斯的疫情发展史,我们可以从中吸取一些经验教训。2007年4月,黑海东海岸格鲁吉亚的波季港附近出现猪死亡率上升现象。5月17日,格鲁吉亚农业部向世界动物卫生组织(OIE)上报称出现断奶后多系统衰竭综合征(PMWS),并认为是猪圆环病毒2型感染所致。6月5日,格鲁吉亚向OIE报告了ASF的首发疫情。随后对来自不同地区的两株格鲁吉亚ASFV分离株进行的分子生物学分析显示,在格鲁吉亚流行的毒株源自同一个毒株,属于基因II型。鉴于该毒株与分离自马达加斯加的毒株最相近,推测格鲁吉亚分离株可能来自非洲南部的东边或马达加斯加而不是来自中非、西非或意大利撒丁岛。鉴于格鲁吉亚ASF首发疫点与黑海的波季港相连,因此推测ASFV可能借国际货轮携带的污染猪肉或猪肉制品传入格鲁吉亚。由于格鲁吉亚的猪大都散养且以泔水为食,因此当地猪很有可能接触到港口丢弃物。这种传播模式其实与20世纪70年代和80年代在许多拉丁美洲和欧洲国家的暴发相似,比如1957年从非洲传入葡萄牙、1971年从欧洲传入巴西和古巴等。波季港离俄罗斯边境并不遥远,当地的野猪可沿小高加索山脉的河谷自由进入俄罗斯境内。2007年12月4日,俄罗斯联邦国际兽疫局向OIE报告发生ASF疫情。虽然无确凿证据证实俄罗斯ASF首发病例来自哪里,但目前普遍认为与格鲁吉亚的ASF疫情关系紧密。由于格鲁吉亚初始诊断失误、防控措施乏力以及易感野猪沿河流迁徙等因素,使得2007年的格鲁吉亚疫情很快传播到邻近国家。由于猪肉制品的非法移动,用未处理的残羹喂猪,自由放养的饲养模式,存在大量未经兽医监督的低生物安全水平的小型农场和低效率的控制措施等原因,使得ASF在俄罗斯持续扩散,农场主的不配合(如隐瞒疫情及处置情况)也加速了疫病在家猪及野猪群体内扩散。此后的10年间,非洲猪瘟病毒在高加索地区向北向西蔓延,造成疫情横跨俄罗斯46个地区,致使80多万头猪的死亡,扑杀数百万头猪,猪肉产量从2007年的1119万吨减少到2017年的608万吨。 经济损失近千亿卢布。从俄罗斯的非洲猪瘟流行史上我们可学习到一些东西:如疫情的及时发现,及时处置如果格鲁吉亚的首例得到了及时的妥当的隔离封锁;后续疫情不会如此的猖獗,泔水、病死猪肉的无害化处理;农民意识的提高等等,回过头来看的时候会发现有很多次机会可以阻止疫情的蔓延。

3、如何防控非洲猪瘟?----HOW

(1)消灭传染源:扑杀病猪及特定区域内的易感动物。

农业部的《非洲猪瘟防治技术规范》中对非洲猪瘟的疫点、疫区、受威胁区,以及关于疫点疫区受威胁区中易感动物、虫媒、野生动物、运输工具、猪舍等等如何进行处置做出了明确的规定。对于动物扑杀

(2)切断传播途径:隔离、限制猪只流动,消毒污染场所、设施设备,猪场粪污、被污染饲料、垫料和餐厨垃圾(泔水)进行无害化处理。同样在《非洲猪瘟防治技术规范》中也对疫区的封锁、关闭活猪市场,限制猪及其产品的调出、场所运输工具的消毒、污染物的无害化处理、及野生动物和虫媒进行控制等等做了详细的规定。

(3)保护易感动物:目前还没有有效的疫苗,无法通过免疫的方式进行保护。但可以通过及时向养猪户介绍非洲猪瘟的临床症状及危害,增强养猪农民的意识,人为的保护易感动物。减少易感动物暴露的机会。

西班牙是世界上为数不多的根除非洲猪瘟的国家,从西班牙的经验中我们也可以学会如果进行防控。自1960年非洲猪瘟传入西班牙,1985年,西班牙颁布ASF根除计划,到1995西班牙宣布根除非洲猪瘟,在根除非洲猪瘟的过程中,西班牙积累了大量的实践经验,非洲猪瘟作为中国的外来病,研究较少,我们可以吸取西班牙的成功经验,用于非洲猪瘟的防控,西班牙非洲猪瘟根除计划的关键措施有:

——流动兽医临床团队网络体系建设。这些临床团队参与动物圈舍的卫生监督、动物识别、流行病学调查,血清样品采集,屠宰场的血清学监测并督促和鼓励养猪生产者创建卫生协会。

——对所有猪场进行血清学监测。为达到此目的,建立了简单快速准确特异的间接ELISA诊断方法,并设国家农业研究院为参考实验室用于协调地方和省级实验室并给予技术支持。在根除计划中共有17个自治区的39个实验室参与了血清学监测。为保证试验的准确和可信度,这些实验室都从国家参考中心引进试验所用耗材。

——提高饲养场及饲养设施的卫生水平。该项计划的实施在于防止该病的散播。包括采用基本的卫生措施,如栅栏,安全处置粪便等。同时财政上也给予相关支持,如给予低利率的贷款用于设施改造。在1985-1990年共有2175个饲养场得到改造。

——剔除所有ASF暴发点,对所有的ASFV携带者进行安乐死,消灭所有感染群。一旦国家参考实验室确认ASF暴发,立刻对感染群的所有猪进行扑杀,同时对周边样品进行采样以进行病毒学和流行病学调查。遵照相关法律,有关主管当局应立刻对感染猪群的生产者进行足额补偿。

——对猪群的移动进行严格控制。交通工具也必须进行合适的冲洗和消毒。运输的动物必须获得官方兽医证明,并标注出发地和卫生状况。在移动动物的整个过程中(包括目的地,如屠宰场和育种场),根除计划的管理者都具有管理控制动物的权利。当猪只抵达屠宰场时,官方兽医会在屠宰之前审查卫生证书。屠宰场必须在屠宰之后仍保存卫生证书至少1年。对于猪肉生产企业,制造商需自动物抵达至最终产品成型的整个过程中保留猪肉来源的证明材料。这些措施受到了养猪业和大量社会力量的积极参与和配合,使得该病的分布和发生率发生了极大变化。

  虽然两国国情、疫情不同,但西班牙的根除经验仍有许多借鉴之处。如ASF根除计划实施时,通过广泛的宣传报道,特别是对农村有针对的进行宣传,使得养殖者能积极主动的参与到根除计划中等。

  对于我们海关人,我们应从本职工作入手,做好以下5点: 一是把好准入关 ,二是把好口岸关,三是把好行邮关,四是把好安全关,五是把好处理关。

  把好准入关。按照《OIE陆生动物卫生法典》要求,确保进境种猪、猪肉和猪肉制品、猪精液等符合进口检疫要求,严格禁止进口来自非洲猪瘟疫区的生猪及其产品。一旦发现夹带、瞒报猪产品的,立即予以封存并严格监督实施销毁处理,并对有关进口企业等依法依规处罚。

  把好口岸关。严禁夹带动物及其制品入境,严格检疫运输工具废弃的餐厨垃圾(泔水)。

把好行邮关。加强对国际运输工具、国际邮件、跨境电商产品、出入境旅客携带物的查验和检疫,严格对进境旅客携带物、寄递物和跨境电商产品的检疫查验,发现来自非洲猪瘟疫区的禁止进境的动物、动物产品及其他检疫物的,一律严格妥善处置。

  把好安全关。防止猪接触受到非洲猪瘟病毒污染的饲料、肉制品、器械,远离野猪,防止被蜱等吸血昆虫叮咬。

把好处理关。对途经我国或在我国停留的国际航班、火车、航行船舶的废弃物和泔水等进行无害化处理。严格开展非洲猪瘟疫区的运输工具以及集装箱的检疫,发现动植物源性废弃物、泔水、餐厨垃圾,一律在海关监管下进行无害化处理。

  最后借用我们动物传染病学的泰斗蔡宝祥先生的话,“现在仍然是扑灭非洲猪瘟的最佳时机”。